​电泳怎么装

电泳怎么装

    在蛋白质和核酸分析的实验中，电泳是所需一步。然而对于许多实验新手来说，面对一堆玻璃板、胶框和电极线，常温的一个问题就是：电泳怎么装？本文将手把手教您掌握垂直电泳槽的安装方法，无论您是使用自配胶还是预制胶，都能轻松应对。

一、安装前的准备：清洗与检查

    在正式讲解电泳怎么装之前，有两项准备工作。

    清洗玻璃板与配件

    玻璃板的洁净度直接影响凝胶质量和电泳效果。组装前，必须用泡沫海绵沾少许中性洗涤剂清洗玻璃板，尤其是与凝胶接触的内侧面。清洗后放在支架上自然晾干，切勿用手指接触灌胶面，以免留下油脂影响凝胶聚合。

    检查密封件与电极

    检查凹型橡胶框是否有老化或变形，确保密封条完整无损。同时观察电极丝是否有氧化痕迹，若有氧化可用细砂纸轻轻打磨恢复导电性。

二、自配胶的安装方法（经典夹芯式）

    对于使用自配聚丙烯酰胺凝胶的用户，以下是标准的电泳怎么装操作流程。

    首要步骤：组装玻璃板与橡胶框

    将四只固定螺杆插入一只贮液槽框（半上槽）的对应孔洞中，将贮液框仰放在桌上。

    左手拿凹型橡胶框，右手拇指与中指捏住玻璃板两侧边缘，轻轻插入橡胶框内。注意手指不能接触灌胶面的玻璃板。

    将带有玻璃板的橡胶框放在仰放的贮液槽框架上，确保下缘对齐。

    第二步：合拢与固定

    双手拿起另一只贮液槽框，与仰放的贮液槽框相合，使橡胶框上的凸出线位于有机玻璃框中间。装上四只螺母，按斜角位置双双逐渐拧紧，确保用力均匀，防止玻璃板受力不均而破裂。

    第三步：封底边（关键步骤）

    将组装好的电泳槽垂直竖起。在长玻璃板与橡胶框之间的缝隙处，用熔化的10%琼脂沿长玻璃板下端灌入封底。为防止留存气泡，可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂凝固后才能灌胶。

    第四步：灌胶与插梳子

    用细头滴管吸取配好的分离胶，沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入。为防止气泡，可稍抬起另一端使气泡往高处走。

    加胶量至距离短玻璃板上端约0.3厘米处，轻轻加少许水封面。

    双手轻轻将梳子插入，待胶凝固后即可看到清晰的加样孔。

三、预制胶的安装方法（更快捷的选择）

    使用预制胶可以省去配胶和灌胶的步骤，但电泳怎么装同样有讲究。

    首要步骤：撕胶带与拔梳子

    从包装袋中取出预制胶，先将胶板底部的蓝色胶带撕去，然后将梳子按箭头方向从胶板中平稳地平行推出。

    第二步：检查密封条

    有些电泳槽的U型密封胶条顶部有突起结构，电泳前需将具有突起结构的密封胶条取出后反向安装，使平坦面朝外，从而防止漏液。

    第三步：安装预制胶

    将预制胶安装到电泳槽中。关键要点：确保胶板底部开口位于电泳装置密封胶条下方，不能被密封胶条遮挡，否则电流无法通过。

    第四步：加缓冲液与冲洗加样孔

    向内槽加入足量电泳缓冲液，液面需浸没加样孔并高出5-7mm。向外槽也加入缓冲液至适当高度。

    重要提示：确保外槽液面低于内槽液面，不可漫过胶板上沿，否则会造成短路。

    用注射器吸取缓冲液，轻轻冲洗加样孔，去除气泡和残留的储存缓冲液。

四、加样与电泳设置

    无论使用自配胶还是预制胶，接下来的步骤都相同。

    加样操作

    将处理好的蛋白样品或DNA样品与上样缓冲液混合。

    用微量加样器吸取样品，斜角45°对准加样孔底部缓慢推液，避免产生气泡，也避免针头戳破胶孔。

    每孔上样量需控制：蛋白电泳5-20μg，核酸电泳10-50ng为宜。

    连接电源

    将电泳槽导线与电泳仪电源连接：红色接正极，黑色接负极。注意蛋白电泳时上样孔侧为负极。

    检查线路无误后，盖上电泳槽盖（具备开盖断电安全功能）。

    设置电泳参数

    蛋白电泳：浓缩胶阶段用80V，待溴酚蓝进入分离胶后调至120-150V。

    核酸电泳：恒压5-10V/cm凝胶长度。

    电泳至指示剂到达凝胶底部适当位置时停止。

五、常见安装问题与排查

    问题1：漏胶或漏液

    可能原因：玻璃板底部未对齐、密封条老化、螺母未拧紧。

    解决方案：检查玻璃板底部是否平齐，重新按对角顺序均匀拧紧螺母，或更换密封条。

    问题2：加样孔变形

    可能原因：凝胶未凝固时插梳子，或拔梳子动作过快。

    解决方案：延长凝胶凝固时间，拔梳子时应垂直平稳拔出，切勿左右摇晃。

    问题3：电泳时条带歪斜

    可能原因：凝胶凝固不均、电极污染或缓冲液液面不等高。

    解决方案：清洗电极，确保内外槽液面符合要求。

总结

    电泳怎么装看似复杂，但只要掌握核心要点，就能轻松应对：玻璃板要洁净、密封要严实、电极连接要正确、液面高度要适宜。无论是自配胶还是预制胶，遵循规范的操作流程，都能获得清晰可靠的条带结果。初次操作时建议在实验记录本上标注正负极方向和关键步骤，熟能生巧后，电泳安装将成为您得心应手的常规操作。

如果您有采购电泳的需求，点击跳转商品页并联系我们。