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使用细胞株有哪些细节要注意

发布日期: 2025-04-17
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  细胞株是科研工作中至关重要的工具,其正确使用对于实验结果的准确性和可重复性具有关键意义。
  细胞株的选择是首要环节。要根据研究目的来挑选合适的细胞株。不同的细胞株具有不同的生物学特性,如肿瘤细胞株、正常细胞株、干细胞株等。如果是研究肿瘤发病机制,可能会选择特定的肿瘤细胞株,如肺癌细胞株 A549、结直肠癌细胞株 SW620 等。这些细胞株应具备明确的来源、背景信息和已验证的生物学特性,可通过查阅相关文献或咨询专业的细胞库获取详细信息。
  细胞的复苏是使用细胞株的重要起始步骤。从液氮罐中取出细胞冻存管后,要迅速放入 37℃的水浴中,不断摇晃,确保冻存液快速融化。这个过程要控制在 1 - 2 分钟内,以减少室温下融解过程对细胞的损伤。融化后,将细胞转移到含有预热培养基的离心管中,轻轻吹打均匀,然后进行离心,去除冻存液中的 DMSO 等有害物质。
  培养条件的优化对于细胞株的生长至关重要。温度通常维持在 37℃,二氧化碳浓度保持在 5%左右,这是大多数哺乳动物细胞所需的环境条件。培养基的选择也要根据细胞株的特点来确定,不同的细胞株对营养物质、生长因子等的需求有所差异。例如,一些癌细胞株可能需要添加血清、胰岛素、谷氨酰胺等特殊成分。
  细胞的传代也有一定技巧。当细胞长到 80% - 90%汇合度时,需要进行传代。首先弃去旧的培养基,用 PBS 清洗细胞以去除残留的血清和杂质。然后加入胰酶消化液,消化时间和温度要严格控制,避免过度消化损伤细胞。当细胞变圆、彼此分离时,加入含有血清的培养基终止消化,轻轻吹打使细胞脱壁,按照适当的比例接种到新的培养皿中。
  细胞的冻存同样不可忽视。当细胞处于对数生长期时,可以进行冻存。冻存液一般由基础培养基、血清和 DMSO 按一定比例混合而成。将细胞与冻存液充分混合后,分装到冻存管中,做好标记,包括细胞名称、传代次数、冻存日期等信息。然后将冻存管逐步降温,先放入 4℃冰箱冷藏一段时间,再转移到 - 80℃超低温冰箱短期保存或液氮罐中长期保存。
  在整个细胞株的使用过程中,严格的无菌操作是必须遵循的原则。使用前要对操作台面、器械等进行消毒,操作过程中要注意防止微生物污染。同时,要定期对细胞进行检查,观察其形态、生长状态等,确保细胞株没有发生变异或被污染。只有这样,才能充分发挥细胞株在科研中的作用,获得可靠的实验数据。
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